You are here
Home > articles

Slot blot dna-kvantifisering

Produkter og tjenester / Standarder og publikasjoner / Journals / Journal of Forensic Sciences.

Volum 50, utgave 5 (september 2005)

En dobbeltsidig realtids qPCR-analyse for kvantifisering av human-nukle r og mitokondriell DNA i rettsmedisiner: Implikasjoner for kvantifisering av DNA i nedbrytte prover.

(Mottatt 2. oktober 2004, akseptert 9. april 2005)

Publisert pa nettet: 2005.

Sit dette dokumentet.

.RIS For RefWorks, EndNote, ProCite, Reference Manager, Zoteo, og mange andre. . DOCX For Microsoft Word.

En tosidig sanntids-qPCR-analyse ble utviklet for kvantifisering av human-nukle rt og mitokondrialt DNA i rettsmedisinske prover. Den kjernefysiske del av analysen benyttet amplifikasjon av en malmalsekvens pa 170 bp, som strekker seg over repeteringsomradet av TH01 STR-locuset, og den mitokondriale del av analysen benyttet amplifikasjon av en 69 bp malsekvens i ND1-regionen. Valideringsstudier, utfort pa et ABI 7000 SDS instrument ved hjelp av TaqMan & reg; deteksjon viste at begge deler av dupleksanalysen gir passende kvantifiseringsfolsomhet og presisjon ned til 10 eksemplarer av hvert genom av interesse, og at ingen av delene viser kryssreaktivitet overfor ofte forekommende ikke-humane genomer. Som en del av valideringsstudiene ble en rekke DNase-nedbrytte prover kvantifisert ved hjelp av tre forskjellige metoder: den dupleks-nuklearmitokondrielle qPCR-analysen, ABI Quantifiler & trade; Human DNA Quantification Kit qPCR assay, som forsterker og detekterer en 62 bp nukle r mal-sekvens og slot-blot-hybridisering. For ikke-nedbrytte og moderat nedbrytede prover i serien var alle tre metodene passende noyaktige for kvantifisering av nukle rt DNA for a oppna vellykkede STR-amplifikasjoner for a gi komplette profiler ved bruk av ABI AmpF 1 STR & reg; Identifiler & trade; kit. For sv rt nedbrytte prover ga imidlertid dobbeltsidig qPCR-analysen bedre estimater av nukle rmal for STR-amplifikasjon enn det enten den kommersielle qPCR-analysen, som overvurderte mengden av STR-storrelse DNA-fragmenter, hvilket forte til en okt andel av uoppdagede alleler ved storre STR-loci eller slott-blot-hybridisering, som undervurderte mengden av nukle rt DNA, hvilket forer til en okt andel av STR-amplifikasjons artefakter pa grunn av amplifikasjon av overflodig mal.

California Justisdepartementet Jan Bashinski DNA Laboratory, Richmond, CA.

California Justisdepartementet Jan Bashinski DNA Laboratory, Richmond, CA.

California Justisdepartementet Jan Bashinski DNA Laboratory, Richmond, CA.

California Justisdepartementet Jan Bashinski DNA Laboratory, Richmond, CA.

Tittel En Dupleks sanntid qPCR-analyse for kvantifisering av human-kjerne- og mitokondriell DNA i rettsmedisinske prover: Implikasjoner for kvantifisering av DNA i nedbrytte prover.

Top

Vil du spille i det mest heldige kasinoet? Vi samlet det for deg. Spill her nå!